期刊简介
本刊为专业学术性刊物。主要报道有关人体寄生虫学与寄生虫病的科研成果和防治经验，介绍新理论、新技术和新进展。主要读者对象为寄生虫学与寄生虫病专业的研究、防治、教学人员及医务工作者。
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首页>中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 杂志名称：中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
- 国际刊号：1000-7423
- 国内刊号：31-1248/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中华预防医学会先进编辑部（97）；中华预防医学会优秀期刊一等奖（00）；中华预防医学会优秀期刊二等奖（01）；中华预防医学会优秀期刊三等奖（01-02）期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
弓形虫复合抗原ROP2-SAG1优势表位与人乳头瘤病毒16型晚期结构蛋白L1融合体的构建及其在真核细胞中的表达
谢自新；姜洁；汪文寰；吕金辉；冯方方；张丽芳；李文姝
关键词：弓形虫, 优势表位, 人乳头瘤病毒16型晚期结构蛋白, 表达
摘要：目的 构建弓形虫复合抗原ROP2-SAG1免疫优势表位(RSepitope)与人乳头瘤病毒16型晚期结构蛋白L1 (HPV16L1)的融合体(RSepitope-HPV16L1),验证其在真核细胞中的表达. 方法 优化RSepitope基因序列,构建pcDNA3.1/RSepitope重组真核表达质粒.从T-HPV16L1质粒中扩增HPV16L1基因片段,构建pcD-NA3.1/RSepitope-HPV16L1重组质粒.双酶切、PCR、测序鉴定正确后,将2个重组质粒分别转染至非洲绿猴肾细胞COS-7细胞,培养48 h后收集细胞,提取RNA,RT-PCR扩增相应的目的基因.Western blotting和间接免疫荧光实验检测重组蛋白RSepitope和RSepitope-HPV 16L1在细胞中的表达. 结果 构建的重组质粒pcDNA3.1/RSepitope和pcDNA3.1/RSepitope-HPV 16L1经PCR扩增和双酶切分别获得282 bp和1 500 bp片段,与预期结果一致,测序结果正确.RT-PCR结果显示,以2个重组质粒转染细胞的cDNA为模板,分别扩增到282 bp和1 500 bp的目的条带.Western blotting分析结果显示,以RSepitope免疫血清为一抗,重组蛋白RSepitope和RSepitope-HPV16L1分别在相对分子质量(Mr)约为10 000和65 000处出现特异性条带;以HPV16L1单克隆抗体为一抗,重组蛋白RSepitope-HPV 16L1在Mr 65 000处出现特异性条带.间接免疫荧光实验结果显示,以RSepitope免疫血清为一抗,重组质粒pcDNA3.1/RSepitope和pcDNA3.1/RSepitope-HPV 16L1转染细胞内均观察到绿色荧光;以HPV16L1单克隆抗体为一抗,重组质粒pcDNA3.1/RSepitope-HPV 16L1转染细胞内观察到特异性绿色荧光. 结论 弓形虫优势表位RSepitope与HPV16L1融合体构建成功,且可在真核细胞中表达.
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