期刊简介
本刊为专业学术性刊物。主要报道有关人体寄生虫学与寄生虫病的科研成果和防治经验，介绍新理论、新技术和新进展。主要读者对象为寄生虫学与寄生虫病专业的研究、防治、教学人员及医务工作者。
往期目录
-
2000
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
首页>中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 杂志名称：中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
- 国际刊号：1000-7423
- 国内刊号：31-1248/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中华预防医学会先进编辑部（97）；中华预防医学会优秀期刊一等奖（00）；中华预防医学会优秀期刊二等奖（01）；中华预防医学会优秀期刊三等奖（01-02）期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
广州管圆线虫半乳糖凝集素-1基因的克隆、表达和凝集反应
李星潘；赵梦静；史晓萌；闫兰竹；闫宝龙；黄慧聪
关键词：广州管圆线虫, 半乳糖凝集素-1, 原核表达, 凝集反应
摘要：目的 克隆、表达广州管圆线虫(A ngiostrongylus cantonensis)半乳糖凝集素-1(galectin-1)基因并分析其凝集反应. 方法 用Swiss Model分析galectin-1的三维结构.提取广州管圆线虫雌性成虫总RNA,根据galectin-1基因编码序列(GenBank登录号为JN133961.1)设计引物,RT-PCR扩增目的基因,亚克隆至pColdⅢ质粒,转化大肠埃希菌(Escherichia coli) BL21,取重组质粒进行双酶切、PCR鉴定和测序.阳性质粒经0.1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,镍柱亲和层析法纯化galectin-1重组表达蛋白后,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白表达情况.以广州管圆线虫全虫免疫的小鼠血清为一抗,蛋白质印迹(Western blotting)验证目的蛋白.将重组蛋白10倍稀释为5.55×10-1～5.55×10-5 ng/μl,显微镜观察其与新鲜的ICR小鼠血液中红细胞的凝集反应. 结果 Swiss Model分析结果显示,galectin-1以非二聚体形式发挥作用.galectin-1基因RT-PCR扩增产物约为850 bp,与预期结果一致.经双酶切、PCR和测序结果显示,重组质粒pColdⅢ-galectin-1构建成功.SDS-PAGE结果显示,经IPTG诱导获得相对分子质量约36 000的可溶性重组融合蛋白.Western blotting分析结果显示,galectin-1蛋白能被全虫免疫的小鼠血清识别.凝集反应结果显示,galectin-1蛋白与小鼠红细胞发生明显凝集反应的低浓度为5.55×10-4 ng/μl. 结论 克隆的galectin-1基因能在pColdⅢ原核表达系统中呈可溶性表达,并与小鼠红细胞发生凝集反应.
友情链接