期刊简介
本刊为专业学术性刊物。主要报道有关人体寄生虫学与寄生虫病的科研成果和防治经验，介绍新理论、新技术和新进展。主要读者对象为寄生虫学与寄生虫病专业的研究、防治、教学人员及医务工作者。
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首页>中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 杂志名称：中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
- 国际刊号：1000-7423
- 国内刊号：31-1248/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中华预防医学会先进编辑部（97）；中华预防医学会优秀期刊一等奖（00）；中华预防医学会优秀期刊二等奖（01）；中华预防医学会优秀期刊三等奖（01-02）期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
基于ITS序列鉴别3种感染白牦牛线虫的PCR-RFLP方法的建立
韩亮；周东辉；刘卿；郑文斌；朱兴全；孙晓林
关键词：肿孔古柏线虫, 环纹背带线虫, 奥斯特线虫, ITS序列, PCR-RFLP
摘要：目的 基于内转录间隔区(ITS)序列,建立鉴别3种感染白牦牛线虫的PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法.方法 将从甘肃省天祝藏族自治县1头白牦牛小肠中分离的12条线虫进行消化并提取DNA,PCR扩增ITS序列并送测序,测序结果在GenBank数据库进行同源性分析.用DNAstar7.1软件分析序列之间的差异,用邻接(NJ)法构建系统进化树.根据序列选择特异的酶切位点,对PCR产物分别进行酶切反应,建立PCR-RFLP方法.结果 12条线虫均扩增出长度约900 bp的ITS序列片段,与预期结果一致.测序结果同源性分析显示,其中3种各4条分别与已报道的肿孔古柏线虫(Cooperia oncophora,GenBank登录号为AB534601)、环纹背带线虫(Teladorsagia circumcincta,GenBank登录号为JF680984)、奥斯特线虫(Ostertagia sp.,GenBank登录号为HQ844228)的序列相似性高于99％.ITS序列比较发现,3种线虫种间差异为4.3％～13.9％,种内差异均低于1％.其中肿孔古柏线虫与奥斯特线虫的ITS序列差异大,为13.6％～13.9％;肿孔古柏线虫与环纹背带线虫ITS序列差异为12.9％～13.1％;环纹背带线虫和奥斯特线虫ITS序列的差异小,为4.3％～4.8％.系统进化树结果显示,3种线虫被分为明显的3支,且环纹背带线虫和奥斯特线虫有更近的亲缘性.ITS序列酶切结果显示,Nde Ⅰ酶可将环背带线虫和肿孔古柏线虫的ITS序列酶切成约650 bp和250 bp的片段,EcoR V酶仅将肿孔古柏线虫酶切成约700 bp和200 bp的片段,2种内切酶均不能酶切奥斯特线虫的ITS序列. 结论 建立的基于ITS序列的PCR-RFLP方法可鉴别感染白牦牛的肿孔古柏线虫、环纹背带线虫、奥斯特线虫.
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