期刊简介
本刊为专业学术性刊物。主要报道有关人体寄生虫学与寄生虫病的科研成果和防治经验，介绍新理论、新技术和新进展。主要读者对象为寄生虫学与寄生虫病专业的研究、防治、教学人员及医务工作者。
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首页>中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 杂志名称：中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
- 国际刊号：1000-7423
- 国内刊号：31-1248/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中华预防医学会先进编辑部（97）；中华预防医学会优秀期刊一等奖（00）；中华预防医学会优秀期刊二等奖（01）；中华预防医学会优秀期刊三等奖（01-02）期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
毛首鞭形线虫丝氨酸蛋白酶抑制剂TtSerpin1对蛋白酶的抑制作用
司徒永立；邵正；邓莉；隋细香；李海舰；许琴英；何庆丰；彭礼飞
关键词：毛首鞭形线虫, 丝氨酸蛋白酶抑制剂, 原核表达, 组织蛋白酶G, 中性粒细胞弹性蛋白酶, 蛋白酶3
摘要：目的 原核表达、分离纯化毛首鞭形线虫(Trichuris trichiura)丝氨酸蛋白酶抑制剂1(TtSerpin1),并观察其对蛋白酶的抑制作用. 方法 从毛首鞭形线虫成虫cDNA中扩增TtSerpin1编码序列(GenBank 登录号为MF401634),将其连接入原核表达载体,构建重组质粒pET3 2a-sumo/ TtSerpin1.将重组质粒转化入大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21 (DE3)中,用异丙基-3-D-硫代半乳糖苷诱导TtSerpin1融合蛋白表达.表达的包涵体蛋白经变性、复性、镍亲和层析纯化、SUMO蛋白酶酶切融合标签后获得rTtSerpin1.用发色底物法检测其对人组织蛋白酶G、中性粒细胞弹性蛋白酶、蛋白酶3、纤溶酶和胰蛋白酶,猪胰蛋白酶、胰弹性蛋白酶及牛α-胰糜蛋白酶的抑制作用. 结果 成功构建了重组质粒p ET3 2a-sumo/ TtSerpin1,并在E.coli中成功表达.表达产物主要为包涵体,复性、纯化后的rTtSerpin1具有较好的蛋白酶抑制活性.1 000 nmol/L的rTtSerpin1对人组织蛋白酶G (100 nmol/L)、中性粒细胞弹性蛋白酶(10 nmol/L)、蛋白酶3(200 nmol/L),猪胰弹性蛋白酶(10 nmol/L),牛α-胰糜蛋白酶(1 nmol/L)的蛋白酶活性抑制率分别为60.89％、82.84％、21.21％、58.32％、96.98％,但对人纤溶酶、胰蛋白酶及猪胰蛋白酶抑制活性较弱.rTtSerpin1对人组织蛋白酶G及中性粒细胞弹性蛋白酶的抑制常数(Ki)分别为(949.80±91.51)、(242.70±53.41) nmol/L. 结论 rTtSerpin1对多种丝氨酸蛋白酶具有较强抑制作用.
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