期刊简介

               本刊为专业学术性刊物。主要报道有关人体寄生虫学与寄生虫病的科研成果和防治经验,介绍新理论、新技术和新进展。主要读者对象为寄生虫学与寄生虫病专业的研究、防治、教学人员及医务工作者。                

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  • 杂志名称:中国寄生虫学与寄生虫病杂志
  • 主管单位:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华预防医学会,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
  • 国际刊号:1000-7423
  • 国内刊号:31-1248/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中华预防医学会先进编辑部(97);中华预防医学会优秀期刊一等奖(00);中华预防医学会优秀期刊二等奖(01);中华预防医学会优秀期刊三等奖(01-02)期刊收录:CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
中国寄生虫学与寄生虫病杂志2016年第03期

刚地弓形虫微线蛋白16基因片段原核表达、纯化及免疫反应性分析

李瑾;崔勇;尹昆;刘功振;肖婷;徐超;魏庆宽;黄炳成;孙慧

关键词:刚地弓形虫, 微线蛋白16, 原核表达, 免疫反应性
摘要:目的 原核表达刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)微线蛋白16(micronemal protein 16,TgMIC 16)的3个基因片段,并分析3个重组蛋白的免疫反应性. 方法 参照GenBank中TgMIC16基因序列,根据功能活性区将其分为3个片段(MI6D1、MI6D2、MI6D3),分别设计引物,以刚地弓形虫RH株速殖子RNA为模板,通过RT-PCR扩增,获得预期的3个DNA片段,双酶切后连接至原核表达载体pET-32a(+),将重组质粒转化人大肠埃希菌(Escherichia coli)TOP10,经PCR、双酶切筛选阳性质粒,测序确认后转化至E.coli Rosetta,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTC)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表达产物.重组蛋白经镍柱纯化后,分别以抗组氨酸(His)单抗和弓形虫感染兔血清为一抗,Western blotting分析其免疫反应性. 结果 TgMIC 16 3个基因片段的RT-PCR扩增产物分别为1 806、1 290、855 bp.双酶切和测序结果显示,3个TgMIC16片段的重组表达质粒构建成功.SDS-PAGE分析结果显示,3个重组蛋白成功表达,且均为以包涵体的形式表达,相对分子质量(Mr)分别为88 000、68 000、52 000.Western blotting分析结果显示,3个纯化的表达蛋白均能被抗His单抗和弓形虫感染兔血清识别. 结论 成功构建并表达TgMIC l6的3个功能活性区,且3个重组蛋白均表现出良好的免疫反应性.