期刊简介
本刊为专业学术性刊物。主要报道有关人体寄生虫学与寄生虫病的科研成果和防治经验，介绍新理论、新技术和新进展。主要读者对象为寄生虫学与寄生虫病专业的研究、防治、教学人员及医务工作者。
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首页>中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 杂志名称：中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
- 国际刊号：1000-7423
- 国内刊号：31-1248/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中华预防医学会先进编辑部（97）；中华预防医学会优秀期刊一等奖（00）；中华预防医学会优秀期刊二等奖（01）；中华预防医学会优秀期刊三等奖（01-02）期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
日本血吸虫胰凝乳蛋白酶样蛋白基因功能的初步研究
柴日奕；王吉鹏；李健；张瑞祥；李青；刘牧；辛玥；徐斌；胡薇
关键词：日本血吸虫, 胰凝乳蛋白酶样蛋白, 原位杂交, RNA干扰, 免疫保护
摘要：目的 探索日本血吸虫胰凝乳蛋白酶样蛋白(chymotrypsin-like protease)在终宿主体内的基因表达、定位和潜在功能,评估该蛋白在小鼠抗血吸虫感染中的免疫保护力. 方法 利用软件分析日本血吸虫胰凝乳蛋白酶样蛋白(SjCTRL)基因(GenBank登录号为FN317561.1)的理化特性,及与其他物种同源基因的种系发生关系.采用整体原位杂交法定位SjCTRL基因转录本在d26成虫中的表达部位.利用实时定量荧光PCR方法监测感染后14、18、22和26 d等4个发育时期雌雄虫的SjCTRL基因转录水平.制备SjCTRL-dsRNA,采用体外浸泡法对d26合抱雌雄虫进行RNA干扰,并利用共聚焦显微镜观察被干扰虫体的形态学变化.设计特异性引物扩增去除跨膜结构的编码基因序列,并克隆至pET-28a原核表达载体,转化大肠埃希菌(E.coli) BL21 (DE3)后进行原核表达.将纯化重组蛋白免疫C57BL/6小鼠,用尾蚴(40±2条/鼠)攻击感染进行动物保护性实验.同时设对照组.感染后35 d收集虫体和肝脏,统计减虫率、每克肝组织减卵率. 结果 原位杂交定位结果显示,该基因转录本位于雌虫后段肠道.SjCTRL基因仅在d26雌虫体内有较高的转录本丰度.SjCTRL-dsRNA干扰后雌虫相应基因转录本的相对表达量降至25.7％ (P＜0.05),但未有可观察到的形态学变化.构建了pET-28a/ SjCTRL重组质粒,诱导表达获得不可溶重组蛋白.免疫保护试验结果显示,减虫率为25.4％,减卯率为80.5％. 结论 初步探明日本血吸虫胰凝乳蛋白酶样蛋白基因仅在d26雌虫的后段肠道高转录,体外干扰可降低SjCTRL基因的转录本水平,该蛋白可一定程度上减少感染日本血吸虫的C57BL/6小鼠的成虫数和肝脏虫卵数.
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