期刊简介
本刊为专业学术性刊物。主要报道有关人体寄生虫学与寄生虫病的科研成果和防治经验，介绍新理论、新技术和新进展。主要读者对象为寄生虫学与寄生虫病专业的研究、防治、教学人员及医务工作者。
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首页>中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 杂志名称：中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
- 国际刊号：1000-7423
- 国内刊号：31-1248/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中华预防医学会先进编辑部（97）；中华预防医学会优秀期刊一等奖（00）；中华预防医学会优秀期刊二等奖（01）；中华预防医学会优秀期刊三等奖（01-02）期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
刚地弓形虫自噬相关蛋白3基因的克隆表达与多抗制备
华倩倩；李相志；万玉静；陈弟；赵徐寒晖；蒋凯；胡昕；潘长旺；谭峰
关键词：刚地弓形虫, 自噬相关蛋白3, 克隆, 表达, 多克隆抗体
摘要：目的 克隆、表达刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)自噬相关蛋白3(TgAtg3)基因,并制备能特异性识别该蛋白的多克隆抗体. 方法 以弓形虫RH株cDNA为模板,构建pET28a-TgAtg3重组质粒,转化入大肠埃希菌(E.coli)Rosetta感受态细胞,经自诱导培养基诱导表达,用镍柱亲和层析法纯化诱导表达产物,以小鼠抗His标签单克隆抗体作为一抗,蛋白质印迹(Western blotting)进行鉴定.以纯化的TgAtg3蛋白作为抗原皮下多点注射免疫日本大耳白兔,125μg/(只·次),免疫4次后心脏取血,制备血清,获得特异性抗TgAtg3多克隆抗体.对制备的多克隆抗体进行Westernblotting与间接免疫荧光法(IFA)鉴定. 结果 双酶切、PCR扩增及测序结果证实目的片段序列正确,原核表达质粒pET28a-TgAtg3构建成功.SDS-PAGE和Western blotting结果表明,重组E.coli中可见相对分子质量(Mr)约44000的可溶性TgAtg3蛋白的高效表达.抗体检测Western blotting结果显示,制备的多克隆抗体能特异性识别弓形虫RH株的TgAtg3蛋白.IFA结果显示,该多克隆抗体可与虫体胞浆内TgAtg3结合. 结论 获得重组可溶性TgAtg3蛋白,制备的多克隆抗体能特异性识别弓形虫RH株的天然Atg3蛋白.
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