期刊简介
本刊为专业学术性刊物。主要报道有关人体寄生虫学与寄生虫病的科研成果和防治经验，介绍新理论、新技术和新进展。主要读者对象为寄生虫学与寄生虫病专业的研究、防治、教学人员及医务工作者。
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首页>中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 杂志名称：中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
- 国际刊号：1000-7423
- 国内刊号：31-1248/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中华预防医学会先进编辑部（97）；中华预防医学会优秀期刊一等奖（00）；中华预防医学会优秀期刊二等奖（01）；中华预防医学会优秀期刊三等奖（01-02）期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
弓形虫复合基因疫苗pcSAG1-ROP5诱导小鼠免疫应答的研究
赵焕阁；范志刚；黄风迎；黄用豪；周松林；林映莹；谭光宏
关键词：刚地弓形虫, 复合基因疫苗, SAG1-ROP5
摘要：目的 观察弓形虫复合基因疫苗pcSAG 1-ROP5免疫小鼠后诱导的免疫应答.方法 构建弓形虫重组真核表达质粒pcSAG1、pcROP5和pcSAG1-ROP5,分别通过PCR、酶切和测序鉴定后,转染人宫颈癌细胞(HeLa细胞),蛋白印迹(Western blotting)分析重组蛋白的体外表达情况.70只昆明小鼠随机均分为5组(每组14只),分别为pcSAG1组、pcROP5组、pcSAG1-ROP5组、空质粒组和空白对照组.重组质粒组每次每只肌注100 μg重组质粒,每2周免疫1次,共3次.空质粒组和空白对照组分别注射等量的空质粒和PBS.于每次免疫前和末次免疫后2周眼眶采血,制备血清.采用ELISA法检测pcSAG1-ROP5组小鼠末次免疫后2周的血清与重组蛋白SAG1、ROP5和SAG1-ROP5结合的效价,以及5组小鼠的各次血清中抗弓形虫抗体IgG水平.末次免疫后3周,每组小鼠取10只腹腔接种103弓形虫速殖子,观察生存时间.末次免疫后4周,采用ELISA法检测小鼠脾细胞培养上清中γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)的水平. 结果 重组真核表达质粒构建成功.Western blotting分析结果显示,重组质粒pcSAG1、pcROP5和pcSAG1-ROP5均能在HeLa细胞中表达,重组蛋白的相对分子质量(Mr)分别为31 000、57 000和88 000.pcSAG1-ROP5组小鼠血清与重组蛋白SAG1、ROP5和SAG1-ROP5结合的效价分别为1∶320、1∶160和1∶2560.3个重组质粒组小鼠血清抗弓形虫IgG抗体水平随着免疫次数的增加和时间的延长逐渐升高,末次免疫后2周,pcSAG1-ROP5组小鼠血清IgG抗体水平(0.612±0.031)显著高于其他各组(P＜0.05).攻击感染后,pcSAG1-ROP5组小鼠的平均存活时间为(288±7)h,较pcSAG1组和pcROP5组分别延长了48 h和96 h(P＜0.05).末次免疫后4周,pcSAG1-ROP5组小鼠脾细胞培养上清中IFN-γ水平[(908.52±6.31) pg/ml]显著高于其他各组(P＜0.05),各组的IL-4水平差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 与弓形虫单基因疫苗pcSAG1和pcROP5相比,复合基因疫苗pcSAG1-ROP5所诱导的抗弓形虫IgG抗体和IFN-γ水平较高,攻击感染后存活时间延长.
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