期刊简介

               本刊为专业学术性刊物。主要报道有关人体寄生虫学与寄生虫病的科研成果和防治经验,介绍新理论、新技术和新进展。主要读者对象为寄生虫学与寄生虫病专业的研究、防治、教学人员及医务工作者。                

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  • 杂志名称:中国寄生虫学与寄生虫病杂志
  • 主管单位:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华预防医学会,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
  • 国际刊号:1000-7423
  • 国内刊号:31-1248/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中华预防医学会先进编辑部(97);中华预防医学会优秀期刊一等奖(00);中华预防医学会优秀期刊二等奖(01);中华预防医学会优秀期刊三等奖(01-02)期刊收录:CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
中国寄生虫学与寄生虫病杂志2012年第03期

蓝氏贾第鞭毛虫基因快速标记载体的构建

巨红妹;王乙惠;张霞;王云华;李雅杰

关键词:蓝氏贾第鞭毛虫, HA标签, 快速标记载体
摘要:目的 构建可快速标记蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)基因的重组载体.方法 采用重叠PCR法将新霉素(Neo)基因置于gdh启动子调控下,并插入pGEM-5zf载体,获得带有Neo筛选标记的重组载体pGL gdh-Neo;并将基因合成所得3'末端带有3×HA标签的多克隆位点区克隆至重组载体pGLgdh-Neo,构建可快速标记贾第虫基因的重组载体pGL MCS-3HA-gdh-Neo.以该载体标记贾第虫H2A基因验证其可用性.PCR扩增组蛋白H2A基因序列,用EcoR Ⅰ和Spe Ⅰ双酶切后克隆至重组载体pGL MCS-3HA-gdh-Neo多克隆位点区.重组质粒线性化后转染虫体,并对G418筛选所获得的H2A贾第虫重组株进行基因组PCR、蛋白质印迹(Western blotting)和免疫荧光分析.结果 构建了带有多克隆位点区和3×HA标签的可快速标记贾第虫基因的重组载体pGL MCS-3HA-gdh-Neo,其长度为4260 bp; H2A重组质粒稳定转染至贾第虫滋养体并正确整合至其基因组,可表达相对分子质量(Mr)为16900的H2A(含3×HA标签).结论 构建了可快速标记贾第虫基因的重组载体pGL MCS-3 HA-gdh-Neo.