期刊简介
本刊为专业学术性刊物。主要报道有关人体寄生虫学与寄生虫病的科研成果和防治经验，介绍新理论、新技术和新进展。主要读者对象为寄生虫学与寄生虫病专业的研究、防治、教学人员及医务工作者。
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首页>中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 杂志名称：中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
- 国际刊号：1000-7423
- 国内刊号：31-1248/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中华预防医学会先进编辑部（97）；中华预防医学会优秀期刊一等奖（00）；中华预防医学会优秀期刊二等奖（01）；中华预防医学会优秀期刊三等奖（01-02）期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
简单异尖线虫D-天冬氨酸蛋白酶基因的克隆和表达
倪芳；徐世三；王逸难；余长茂；罗大民
关键词：简单异尖线虫, D-天冬氨酸蛋白酶, 克隆, 原核表达
摘要：目的 克隆简单异尖线虫Ⅲ期幼虫(L3)的D-天冬氨酸蛋白酶基因(AsAP)全长,研究其表达蛋白的特性.方法 根据GenBank中简单异尖线虫D-天冬氨酸蛋白酶基因表达序列标签的部分信息,设计特异引物并用cDNA末端快速扩增技术得到AsAP全长序列,分析推导的蛋白序列特征,并预测其三级结构.用RT-PCR扩增简单异尖线虫L3的AsAP 基因编码序列,产物用EcoRⅠ和Sal Ⅰ双酶切,连入表达载体pET32a(+),转化大肠埃希菌(E.coli) BL21 (DE3),以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测.结果 简单异尖线虫L3的AsAP基因全长1753 bp,编码453个氨基酸,与锡兰钩虫(Ancylostoma ceylanicum)的D-天冬氨酸蛋白酶相似性达65％.该蛋白具有两个保守的催化域,1个活性中心翼环,S2和S3亚位点各1个；具有由20个氨基酸组成的N端信号肽,构成疏水性强的跨膜域.不同浓度的IPTG (0.2～～1.6 mmol/L)诱导对AsAP表达的影响较小,1.0 mmol/LIPTG诱导2h后表达量达到高水平.结论 克隆并表达了简单异尖线虫的D-天冬氨酸蛋白酶.
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