期刊简介
本刊为专业学术性刊物。主要报道有关人体寄生虫学与寄生虫病的科研成果和防治经验，介绍新理论、新技术和新进展。主要读者对象为寄生虫学与寄生虫病专业的研究、防治、教学人员及医务工作者。
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首页>中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 杂志名称：中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
- 国际刊号：1000-7423
- 国内刊号：31-1248/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中华预防医学会先进编辑部（97）；中华预防医学会优秀期刊一等奖（00）；中华预防医学会优秀期刊二等奖（01）；中华预防医学会优秀期刊三等奖（01-02）期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
周期型马来丝虫CPI基因真核表达载体的构建和免疫学研究
张赛楠；方政；陆施娟；王慧；徐邦生
关键词：马来丝虫, 半胱氨酸蛋白酶抑制剂, 真核表达载体, 免疫
摘要：目的 构建周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(BmC PI)基因真核表达载体pcDNA3.1-BmCPI,并观察其在小鼠体内的免疫应答反应.方法 以周期型马来丝虫总RNA为模板,逆转录PCR (RT-PCR)扩增目的基因片段.与pGEM-T Easy克隆载体连接,筛选出阳性克隆,经PCR和双酶切鉴定后,亚克隆至真核表达质粒pcDNA3.1,构建pcDNA3.1-BmCPI表达载体.将48只小鼠随机分为4组,每组12只,分别为健康对照组、空质粒组、pcDNA3.1-BmCPI组和pcDNA3.1-BmCPI/CpG组,分别注射PBS 100μl、空质粒pcDNA3.1 100 μg、重组质粒pcDNA3.1-BmCPI100 μg和重组质粒pcDNA3.1-BmCPI 100 μg+佐剂CpG 30 μg,采用左后腿胫前肌注射免疫.每2周1次,共3次,于末次免疫后第4周,用RT-PCR方法检测小鼠注射部位肌肉组织内目的基因转录情况.于末次免疫后第4和第6周,用噻唑蓝(MTT)法检测小鼠T淋巴细胞刺激增殖水平.于末次免疫后第2、4和6周,用ELISA法检测小鼠血清γ干扰素(IFN-γ)和白介素4(IL-4)水平.结果 成功构建了pcDNA3.1-BmCPI真核表达载体,基因片段大小为621 bp.该真核表达载体免疫小鼠后,从小鼠肌肉组织扩增出目的基因.末次免疫后第4和第6周,2个免疫组小鼠淋巴细胞刺激增殖指数均显著高于健康对照组和空质粒组(53.789± 1.937、59.735±4.139和61.975±1.029)(均P＜0.05),2个免疫组间差异无统计学意义(P＞0.05).于末次免疫后第2、4和6周,pcDNA3.1 -BmCPI组和pcDNA3.1-BmCPI/CpG组小鼠血清IFN-γ水平随时间延长逐渐升高,分别为69.544±3.145和106.069±7.518、120.019±5.968和136.229±7.198、149.109±2.700和178.429±1.126,均显著高于健康对照组和空质粒组(28.264±1.129、35.179±1.029和40.110±1.176)(均P＜0.05),其中末次免疫后第2和第6周,pcDN A3.1-BmCPI/CpG组IFN-γ水平显著高于pcDNA3.1-BmCPI组(均P＜0.05).于末次免疫后第4和第6周,2个免疫组的IL-4水平均显著高于健康对照组和空质粒组(均P＜0.05),2个免疫组间差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 pcDNA3.1-BmCPI真核表达载体能在小鼠体内转录,并可诱导免疫应答.
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