期刊简介
本刊为专业学术性刊物。主要报道有关人体寄生虫学与寄生虫病的科研成果和防治经验，介绍新理论、新技术和新进展。主要读者对象为寄生虫学与寄生虫病专业的研究、防治、教学人员及医务工作者。
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首页>中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 杂志名称：中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
- 国际刊号：1000-7423
- 国内刊号：31-1248/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中华预防医学会先进编辑部（97）；中华预防医学会优秀期刊一等奖（00）；中华预防医学会优秀期刊二等奖（01）；中华预防医学会优秀期刊三等奖（01-02）期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
刚地弓形虫绿色荧光蛋白突变株的构建
吴亮；袁异玮；姜旭淦；傅行礼；逯兆喜；涂国华；李礼；陈盛霞；周红
关键词：弓形虫, 突变株, 绿色荧光蛋白, 荧光显微镜, 流式细胞仪
摘要：目的 构建稳定表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的弓形虫突变株,探讨以其检测宿主细胞感染率的效果.方法 在人子宫颈癌(HeLa)细胞中培养弓形虫RH株速殖子,电穿孔法向虫体导入质粒ptubP30-GFP/sag-CAT,氯霉素和极限稀释法筛选稳定表达P30-GFP融合蛋白的突变株,RT-PCR法和荧光显微镜检测GFP蛋白在虫体内的表达.HeLa细胞分别感染1×104～1×107个突变株虫体,24h后,显微镜计数各孔10个高倍镜视野下具有GFP荧光的HeLa细胞数.流式细胞仪检测“纳虫泡”,评估HeLa细胞感染率.结果 导入ptubP30-GFP/sag-CAT质粒后,经氯霉素筛选获得阳性克隆.RT-PCR检出虫体GFP基因表达,镜下可见GFP荧光聚集于虫体外膜.HeLa细胞感染率随虫体接种量的增多而增加,接种1×104～1×107个虫体24h后,具有GFP荧光的HeLa细胞数分别为(14±6)、( 133±45)、(332±93)和(443±90)个；流式细胞仪检测HeLa细胞感染率分别为(0.49±0.09)％、(8.76±0.50)％、(21.02±1.49)％和(39.00±3.47)％.结论 构建了刚地弓形虫GFP荧光蛋白突变株,为检测虫体在宿主细胞内的增殖提供了新途径.
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