期刊简介
本刊为专业学术性刊物。主要报道有关人体寄生虫学与寄生虫病的科研成果和防治经验，介绍新理论、新技术和新进展。主要读者对象为寄生虫学与寄生虫病专业的研究、防治、教学人员及医务工作者。
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首页>中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 杂志名称：中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
- 国际刊号：1000-7423
- 国内刊号：31-1248/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中华预防医学会先进编辑部（97）；中华预防医学会优秀期刊一等奖（00）；中华预防医学会优秀期刊二等奖（01）；中华预防医学会优秀期刊三等奖（01-02）期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
美洲大蠊精氨酸激酶基因的克隆、表达及变应原活性测定
陈家杰；夏立新；刘志刚；刘雯；吉坤美
关键词：美洲人蠊, 精氯酸激酶, 基因表达, 变应原活性
摘要：目的 克隆美洲大蠊 (Periplaneta americana) 精氨酸激酶 (arginine kinase,AK) 基因并表达、纯化具有变应原活性的重组AK. 方法提取美洲大蠊总RNA,设计特异引物,通过RT-PCR克隆美洲大蠊AK基因目的 片段.测序后将该片段克隆入原核表达载体pET-28a,转化至大肠埃希菌 (E.coli) BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获重组AK.用镍离子 (Ni2+)亲和层析柱纯化,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDSPAGE) 分析重组AK表达情况.用蛋白质印迹分析(Western blotting)(变性条件)和ELISA(非变性条件)检测霞组AK变应原与过敏患者血清IgE结合活性,并以健康人血清为对照. 结果测序结果表明,AK基因含有1068 bp的开放阅读框,编码356个氨基酸(登录号为EU429466).与GenBank公布的序列(登录号为AY563004)比较同源性达99.9%.SDS-PAGE分析表明,该变应原基因在E.coli中主要以可溶形式高水平表达,相对分子质量约为Mr45000.重组变应原AK在变性与非变性条件下,与过敏患者血清IgE均具有良好的结合活性,与健康人对照组之间的差异具有统计学意义(P＜0.05). 结论获得了具有变应原活性的重组美洲大蠊精氨酸激酶.
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