期刊简介
本刊为专业学术性刊物。主要报道有关人体寄生虫学与寄生虫病的科研成果和防治经验，介绍新理论、新技术和新进展。主要读者对象为寄生虫学与寄生虫病专业的研究、防治、教学人员及医务工作者。
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首页>中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 杂志名称：中国寄生虫学与寄生虫病杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
- 国际刊号：1000-7423
- 国内刊号：31-1248/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中华预防医学会先进编辑部（97）；中华预防医学会优秀期刊一等奖（00）；中华预防医学会优秀期刊二等奖（01）；中华预防医学会优秀期刊三等奖（01-02）期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
日本血吸虫腺苷酸激酶基因的表达及其重组蛋白免疫反应性的评价
彭鸿娟；陈晓光；李华；王春梅
关键词：日本血吸虫, 腺苷酸激酶, 基因表达, 蛋白质纯化, 蛋白质印迹法, 酶联免疫吸附测定
摘要：目的将亚克隆入pET32a(+)质粒的日本血吸虫腺苷酸激酶(adenylate kinase,AK)基因进行表达及蛋白纯化,并对表达产物的免疫反应性进行评价.方法将重组表达质粒pET32a(+)-AK转入宿主菌大肠埃希菌BL21,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后超声裂菌,离心,取上清进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE);将SDS-PAGE后的蛋白转移至聚偏二氟乙烯(PVDF)膜上,分别用6-组氨酸(6-His)抗体、日本血吸虫尾蚴感染6 wk的兔血清及紫外照射减毒尾蚴免疫的兔血清为一抗进行蛋白质印迹试验(Western blotting);用金属Ni螯合物亲和层析树脂(Ni-NTA)层析柱纯化目标蛋白;以纯化后的融合蛋白为包被抗原,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测正常兔血清和血吸虫感染兔血清.结果重组菌用IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE,于相对分子质量(Mr)40 000处见一特异表达带,与预期表达的融合蛋白大小相符;Western印迹分析显示该重组的融合蛋白带有预期的6-His基团,且能与尾蚴感染兔血清及紫外照射减毒尾蚴免疫的兔血清发生特异性反应;ELISA结果显示纯化的重组AK蛋白可以特异识别血吸虫感染兔血清.结论AK基因在工程菌中以可溶性融合蛋白的形式得到表达,该重组蛋白与血吸虫感染兔血清及紫外照射减毒尾蚴免疫的兔血清具有特异的免疫反应性.
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